一、糖發(fā)酵管
成分：
| 牛肉膏 | 5g |
| 蛋白胨 | 10g |
| 氯化鈉 | 3g |
| 磷酸氫二鈉 | 2g |
| 0.2%滇麝香草酚藍溶液 | 12mL |
| 蒸餾水 | 1000mL |
PH = 7.4
制法：
1. 葡萄糖發(fā)酵管按上述成分配好后，按0.5%加入葡萄糖，分裝于有一個倒置小管的小試管內(nèi)，121℃高壓滅菌15min。
2. 其他各種糖發(fā)酵管可按上述成分配好后，分裝每瓶1000 mL，121℃高壓滅菌15min。另將各種糖類分別配好10%溶液，同時高壓滅菌。將5mL糖溶液加入于100 mL培養(yǎng)基內(nèi)，以無菌操作分裝小試管。
注：蔗糖不純，加熱后會自行水解者，應采用過濾法除菌。
試驗方法：從瓊脂斜面上挑取小量培養(yǎng)物接種，于36℃±1℃培養(yǎng)，一般觀察2～3d。遲緩反應需觀察14～30d。
二、乳糖膽鹽發(fā)酵管
成分：
| 蛋白胨 | 20g |
| 豬膽鹽(或牛、羊膽鹽) | 5g |
| 乳糖 | 10g |
| 0.04%滇甲酚紫水溶液 | 25mL |
| 蒸餾水 | 1000mL |
制法：
將蛋白胨，膽鹽及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示劑，分裝每管10 mL，并放入一個小倒管，115℃高壓滅菌15min。
注：雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管除蒸餾水外，其他成分加倍。
三、5%乳糖發(fā)酵管
成分：
| 蛋白胨 | 0.2g |
| 氯化鈉 | 0.5g |
| 乳糖 | 5g |
| 2%溴麝香草酚藍水溶液 | 1.2mL |
| 蒸餾水 | 100mL |
pH = 7.4
制法：
除乳糖以外的各成分：溶解于50mL蒸餾水內(nèi)，校正pH。將乳糖溶解于另外50mL蒸餾水內(nèi)，分別滅菌121 ℃ 15min，將兩液混合，以無菌操作分裝于滅菌小試管內(nèi)。
注：在此培養(yǎng)基內(nèi)，大部分乳糖遲緩發(fā)酵的細菌可于ld內(nèi)發(fā)酵。
四、緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR和VP試驗用)
成分：
| 磷酸氫二鉀 | 5g |
| 多胨 | 7g |
| 葡萄糖 | 5g |
| 蒸餾水 | 1000mL |
制法：
溶化后校正pH，分裝試管，每管1mL，121℃高壓滅菌15min。
甲基紅(MR)試驗：
自瓊脂斜面挑取少量培養(yǎng)物接種本培養(yǎng)基中，于36±1℃培養(yǎng)2～5d，哈夫尼亞菌則應在22～25℃培養(yǎng)。滴加甲基紅試劑一滴，立即觀察結(jié)果。鮮紅色為陽性，黃色為陰性，甲基紅試劑配法：10mg甲基紅溶于30mL95%乙醇中，然后加入20 mL蒸餾水。
V-P試驗：
用瓊脂培養(yǎng)物接種本培養(yǎng)基中，于36±1℃培養(yǎng)2～4d。哈夫尼亞菌則應在22～25℃培養(yǎng)。加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氫氧化鉀溶液0.2mL充分振搖試管，觀察結(jié)果陽性反應立刻或于數(shù)分鐘內(nèi)出現(xiàn)紅色，如為陰性，應放在36±1℃下培養(yǎng)4h再進行觀察。
五、營養(yǎng)明膠
成分：
| 蛋白胨 | 5g |
| 牛肉膏 | 3g |
| 明膠 | 120g |
| 蒸餾水 | 1000mL |
pH = 6.8～7.0
制法：
加熱溶解，校正至pH7.4～7.6，分裝小管，121℃高壓滅菌10min，取出后迅速冷卻，使其凝固，復查最終pH應為6.8～7.0。
試驗方法：用瓊脂培養(yǎng)物穿刺接種，放在22～25℃培養(yǎng)，每天觀察結(jié)果，記錄液化時間。或放在36士1℃培養(yǎng)，每天取出，放冰箱內(nèi)30min后再觀察結(jié)果。
六、苯丙氨酸培養(yǎng)基
成分：
| 酵母浸膏 | 3g |
| DI-苯丙氨酸(L-苯丙氨酸) | 2g(1g) |
| 磷酸氫二鈉 | 1g |
| 氯化鈉 | 5g |
| 瓊脂 | 12g |
| 蒸餾水 | 1000mL |
制法：
加熱溶解后分裝試管，121℃高壓滅菌15min，使成斜面。
試驗方法：
自瓊脂斜面上挑取大量培養(yǎng)物，移種于苯丙氨酸瓊脂，在36士1℃培養(yǎng)4h或18～24h，滴加10%三氯化鐵溶液2～3滴，自斜面培養(yǎng)物上流下，苯丙氨酸脫氨酶陽性者呈深綠色。
七、蛋白胨水(靛基質(zhì)試驗用)
成分：
| 蛋白胨(或胰蛋白胨) | 20g |
| 氯化鈉 | 5g |
| 蒸餾水 | 1000mL |
pH = 7.4
制法：
按上述成分配制，分裝小試管，121℃高壓滅菌15min。
靛基質(zhì)試劑
① 柯凡克試劑：將5g對二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中，然后緩慢加入濃鹽酸25ml。
② 歐-波試劑：將1g對二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇內(nèi)，然后緩慢加入濃鹽酸20 ml。試驗方法：挑取小量培養(yǎng)物接種，在36士1℃培養(yǎng)1～2d，必要時可培養(yǎng)4～5d。加入柯凡克試劑約0.5mL，輕搖試管，陽性者于試劑層呈深紅色；或加入歐-波試劑約0.5 mL，沿管壁流下，覆蓋于培養(yǎng)液表面，陽性者于液面接觸處呈玫瑰紅色。
注：蛋白胨中應含有豐富的色氨酸。每批蛋白胨買來后，應先用已知菌種鑒定后方可使用。
八、硫酸亞鐵瓊脂(硫化氫試驗用)
成分：
| 牛肉膏 | 3g |
| 酵母浸膏 | 3g |
| 蛋白胨 | 10g |
| 硫酸亞鐵 | 0.2g |
| 硫代硫酸鈉 | 0.3g |
| 氯化鈉 | 5g |
| 瓊脂 | 12g |
| 蒸餾水 | 1000ml |
制法：
加熱溶解，校正pH，分裝試管，115℃高壓滅菌15min，取出直立候其凝固。
試驗方法：
挑取瓊脂培養(yǎng)物，沿管壁穿刺，于36士1℃培養(yǎng)1～2d，觀察結(jié)果。產(chǎn)硫化氫者使培養(yǎng)基變?yōu)楹谏?/p>
注：腸桿菌科細菌測定硫化氫的產(chǎn)生，應采用三糖鐵瓊脂或本培養(yǎng)基。
九、尿素瓊脂
成分：
| 蛋白胨 | 1g |
| 氯化鈉 | 5g |
| 葡萄糖 | 1g |
| 磷酸二氫鉀 | 2g |
| 4%酚紅溶液 | 3ml |
| 瓊脂 | 20g |
| 蒸餾水 | 1000ml |
| 20%尿素溶液 | 100mL |
制法：
將除尿素和瓊脂以外的成分配好，并校正pH，加入瓊脂，加熱溶化并分裝燒瓶。121℃高壓滅菌15min。冷至50～55℃，加入經(jīng)除菌過濾的尿素溶液，尿素的最終濃度為2%，最終pH應為7.2±0.1.分裝于滅菌試管內(nèi)，放成斜面?zhèn)溆谩?/p>
試驗方法：
挑取瓊脂培養(yǎng)物接種，在36士1℃培養(yǎng)24h，觀察結(jié)果。尿素酶陽性者由于產(chǎn)堿而使培養(yǎng)基變?yōu)榧t色。
十、氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基
成分：
| 蛋白胨 | 10g |
| 氯化鈉 | 5g |
| 磷酸二氫鉀 | 0.225g |
| 磷酸氫二鈉 | 5.64g |
| 蒸餾水 | 1000ml |
| 0.5%氰化鉀溶液 | 20ml |
pH = 7.6
制法：
將除氰化鉀以外的成分配好后分裝燒瓶，121℃高壓滅菌15min。放在冰箱內(nèi)使其充分冷卻。每100 mL培養(yǎng)基加入0.5%氰化鉀溶液2.0mL(最后濃度為1:10000)，分裝于12mm×100mm滅菌試管，每管約4mL，立刻用滅菌橡皮塞塞緊，放在4℃冰箱內(nèi)，至少可保存兩個月。同時，將不加氰化鉀的培養(yǎng)基作為對照培養(yǎng)基，分裝試管備用。
十一、營養(yǎng)瓊脂
成分：
| 蛋白胨 | 10g |
| 牛肉膏 | 3g |
| 氯化鈉 | 5g |
| 瓊脂 | 15～20g |
| 蒸餾水 | 1000mL |
制法：
將除瓊脂以外的各成分溶解于蒸餾水內(nèi)，加入15%氫氧化鈉溶液約2mL，校正pH至7.2～7.4。加入瓊脂，加熱煮沸，使瓊脂溶化分裝燒瓶，121℃高壓滅菌15min。
注：此培養(yǎng)基可供一般細菌培養(yǎng)之用，可傾注平板或制成斜面。如用于菌落計數(shù)，瓊脂量為1.5%；如作成平板或斜面，則應為2%。
十二、營養(yǎng)肉湯
成分：
| 蛋白胨 | 10g |
| 牛肉膏 | 3g |
| 氯化鈉 | 5g |
| 蒸餾水 | 1000mL |
pH = 7.4
制法：
按上述成分混合，溶解后校正pH，分裝燒瓶，每瓶225 mL ，121℃高壓滅菌15min。
十三、緩沖蛋白胨水(BP)
成分：
| 蛋白胨 | 10g |
| 氯化鈉 | 5g |
| 磷酸氫二鈉 | 9g |
| 磷酸二氫鉀 | 1.5g |
| 蒸餾水 | 1000mL |
pH = 7.2
制法：
按上述成分配好后以大燒瓶裝，121℃高壓滅菌15min。臨用時無菌分裝每瓶225mL。
注：本培養(yǎng)基供沙門氏菌前增菌用。
十四、EC肉湯
成分：
| 胰蛋白胨 | 20g |
| 3號膽鹽(或混合膽鹽) | 1.5g |
| 乳糖 | 5g |
| 磷酸氫二鉀 | 4g |
| 磷酸二氫鉀 | 1.5g |
| 氯化鈉 | 5g |
| 蒸餾水 | 1000mL |
制法：
將上述成分混合，溶解后，分裝有發(fā)酵倒管的試管中，121℃高壓滅菌15min。最終pH為6.9±0.2。
十五、四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB)
基礎培養(yǎng)基
| 多胨或眎胨 | 5g |
| 膽鹽 | 1g |
| 碳酸鈣 | 10g |
| 硫代硫酸鈉 | 3g |
| 蒸餾水 | 1000mL |
碘溶液
| 碘 | 6g |
| 碘化鉀 | 5g |
| 蒸餾水 | 20ml |
制法：
將基礎培養(yǎng)基的各成分加入蒸餾水中，加熱溶解，分裝每瓶100mL。分裝時應隨時振搖，使其中的碳酸鈣混勻，121℃高壓滅菌15min備用。臨用時每100mL基礎培養(yǎng)基中加入碘溶液2mL，0.1%煌綠溶液1mL。
十六、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)
成分：
| 蛋白胨 | 5g |
| 乳糖 | 4g |
| 亞硒酸氫鈉 | 4g |
| 磷酸氫二鈉 | 5.5g |
| 磷酸二氫鉀 | 4.5g |
| L-胱氨酸 | 0.01g |
| 蒸餾水 | 1000mL |
1% L-胱氨酸-氫氧化鈉溶液的配法：稱取L-胱氨酸0.1g或(DL-胱氨酸0.2g)，加1mol/L氫氧化鈉1.5mL，使溶解，再加入蒸餾水8.5mL即成。
制法：
將除亞硒酸氫鈉和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸餾水中，加熱煮沸，候冷備用。另將亞硒酸氫鈉溶解于100mL蒸餾水中，加熱煮沸，候冷，以無菌操作與上液混合。再加入1% L-胱氨酸-氫氧化鈉溶液1mL。
分裝于滅菌瓶中．每瓶100mL，pH應為7.0±0.1。
十七、亞硫酸鉍瓊脂(BS)
成分：
| 蛋白胨 | 10g |
| 牛肉膏 | 5g |
| 葡萄糖 | 5g |
| 硫酸亞鐵 | 0.3g |
| 磷酸氫二鈉 | 4g |
| 煌綠 | 0.025g |
| 檸檬酸鉍銨 | 2g |
| 亞硫酸鈉 | 6g |
| 瓊脂 | 18～20g |
| 蒸餾水 | 1000mL |
pH = 7.5
制法：
1、將前面5種成分溶解于300mL蒸餾水中。
2、將檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉另用50mL蒸餾水溶解。
3、將瓊脂于600mL蒸餾水中煮沸溶解，冷至80℃。
4、將以上三液合并，補充蒸餾水至1000mL，校正pH，加0.5%煌綠水溶液5mL，搖勻，冷至50～55℃，傾注平皿。
注：此培養(yǎng)基不需高壓滅菌。制備過程不宜過分加熱，以免降低其選擇性。應在臨用前一天制備，貯存于室溫暗處，超過48h不宜使用。
十八、三糖鐵瓊脂(TSI)
成分：
| 蛋白胨 | 20g |
| 牛肉膏 | 5g |
| 乳糖 | 10g |
| 蔗糖 | 10g |
| 葡萄糖 | 1g |
| 氯化鈉 | 5g |
| 硫酸亞鐵銨 | 0.2g |
| 硫代硫酸鈉 | 0.2g |
| 瓊脂 | 12g |
| 酚紅 | 0.025g |
| 蒸餾水 | 1000ml |
pH = 7.4
制法：
將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中，校正pH，加入瓊脂，加熱煮沸，以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5 mL，搖勻，分裝試管。裝量宜多些，以便得到較高的底層。121℃高壓滅菌15min，放置高層斜面?zhèn)溆谩?/p>
十九、三糖鐵瓊脂換用方法
成分：
| 蛋白胨 | 15g |
| 眎胨 | 5g |
| 牛肉膏 | 3g |
| 酵母膏 | 3g |
| 乳糖 | 10g |
| 蔗糖 | 10g |
| 葡萄糖 | 1g |
| 氯化鈉 | 5g |
| 硫酸亞鐵 | 0.2g |
| 硫代硫酸鈉 | 0.3g |
| 瓊脂 | 12g |
| 酚紅 | 0.025g |
| 蒸餾水 | 1000ml |
pH = 7.4
制法：
將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中，校正pH，加入瓊脂，加熱煮沸，以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5 mL，搖勻，分裝試管，裝量宜多些，以便得到較高的底層。121℃高壓滅菌15min，放置高層斜面?zhèn)溆谩?/p>
二十、嗜鹽性試驗培養(yǎng)基
成分：
| 蛋白胨 | 2g |
| 氯化鈉 | 按不同量加 |
| 蒸餾水 | 100ml |
pH = 7.7
制法：
配制2%蛋白胨水，校正pH，共配制5瓶，每瓶100mL。每瓶分別加入不同量的氯化鈉：(1)不加；(2)3g；(3)7g；(4)9g；(5)11g。待溶解后分裝試管，121℃高壓滅菌15min。
