一、 分光光度計檢定(測試)的主要項目對分析結果的影響
1) 波長準確度
分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對應于樣品吸收光譜中的某一個吸收峰的波長。由于儀器的制造和調整誤差，單色光的實際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度，對波長準確度要求允許寬些。但是，當吸收峰寬度較小，而且吸收峰兩側邊緣比較陡直，此時波長準確度的影響就必須引起注意。
2) 透射比（吸光度）準確度
很顯然，透射比或吸光度的誤差越大，測試結果的可信性越差，從而影響到測試數(shù)據(jù)的準確性。
3) 雜散光
雜散光是由于光學元件制造誤差以及光學和機械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光，隨著樣品濃度的增加，雜散光的影響也隨之增大，將給分析結果帶來一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強度和檢測器的靈敏度均明顯減弱，雜散光的影響更不能忽視。因此，雜散光的大小也是儀器性能的一項重要指標。
二、與分光光度計正確使用和維護有關的幾個注意事項
1）若大幅度改變測試波長，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“100%”點。然后再測量。
2）指針式儀器在未接通電源時，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進行機械調零。
3）比色皿使用完畢后，請立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。
4）操作人員不應輕易動燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。
5）WFZ800-DA、756型等分光光度計，由于其光電接收裝置為光電倍增管，它本身的特點是放大倍數(shù)大，因而可以用于檢測微弱光電信號，而不能用來檢測強光。否則容易產(chǎn)生信號漂移，靈敏度下降。針對其上述特點，在維修、使用此類儀器時應注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下，因此在預熱時，應打開比色皿蓋或使用擋光桿，避免長時間照射使其性能漂移而導致工作不穩(wěn)。
6）放大器靈敏度換擋后，必須重新調零。
7）比色皿的配套性問題。比色皿必須配套使用，否則將使測試結果失去意義。在進行每次測試前均應進行比較。具體方法如下；分別向被測的兩只比色皿里注入同樣的溶液，把儀器置于某一波長處，石英比色皿：220nm、700nm裝蒸餾水，玻璃比色皿：700nm處裝蒸餾水，將某一個池的透射比值調至100%，測量其他各池的透射比值，記錄其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范圍內則可以配套使用，若超出此范圍應考慮其對測試結果的影響。
三、分光光度計操作中容易出現(xiàn)的典型故障及其排除方法
1）儀器不能調零。可能原因：
a）光門不能完全關閉。解決方法：修復光門部件，使其完全關閉。
b）透過率“100%”旋到底了。解決方法：重新調整“100%”旋鈕。
c）儀器嚴重受潮。解決方法：可打開光電管暗盒，用電吹風吹上一會兒使其干燥，并更換干燥劑。
d）電路故障。解決方法：檢修電路。
2）儀器不能調“100%”。可能原因：
a）光能量不夠。解決方法：增加靈敏度倍率檔位，或更換光源燈（盡管燈還亮）。
b）比色皿架未落位。解決方法：調整比色皿架使其落位。
c）光電轉換部分老化。解決方法：更換部件。
d）電路故障。解決方法：調修電路。
3) 測量過程中,“100%”點經(jīng)常變動。可能原因：
a）比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解決方法：用擦鏡紙擦干凈比色皿表面，然后將其安放在比色槽的左邊，上面用定位夾定位。
b）電路故障（電壓、光電接收、放大電路）。解決方法：送修。
4) 數(shù)顯不穩(wěn)。可能原因：
a）預熱時間不夠。解決方法：延長預熱時間至30分鐘左右（部分儀器由于老化等原因，長時間處于工作狀態(tài)時，也會工作不穩(wěn)）。
b）光電管內的干燥劑失效，使微電流放大器受潮。解決方法：烘烤電路，并更換或烘烤干燥劑。
c）環(huán)境振動過大、光源附近空氣流速大、外界強光照射等。解決方法：改善工作環(huán)境。
d）光電管、電路等其它原因。
四、提高分光光度計透射比檢定及使用精度的幾種方法
在分光光度計的使用或檢定中，透射比(吸光度)的準確度是衡量儀器工作性能的一項重要指標，它的準確程度直接關系到所測數(shù)據(jù)的可信性及科學性。所以提高此項指標的使用及檢定準確度顯得尤為重要。下面結合近年來對分光光度計的檢定或修理實踐，把如何提高透射比的測試及使用精度的幾點方法列表敘述如下：
| 透射比準確度偏低的原因 | 相應的解決辦法 |
| (1)通過樣品池的光斑不居中 | 調整光源位置，使光斑居中 |
| (2)樣品池架的推拉裝置定位不精確(微量杯) | 測試時反復推拉，加強定位或修復 |
| (3)預熱時間不夠或過長 | 根據(jù)儀器具體情況延長或縮短預熱時間 |
| (4)光源強度不夠，使噪聲的影響相對明顯，進而影響測試結果 | 更換新的光源(尤其是紫外光源) |
| (5)光電轉換部分老化 | 更換新的光電轉換裝置 |
| (6)計量檢定中沒有正確使用空白比色架 | 在計量檢定中，以空氣做參比時，使用空白比色架， 確保進入樣品及參比的光量一致 |
| (7)參比杯與樣品杯不配套 | 使用透射比之差在0.5%范圍內的配套比色杯 |
五、小結
綜上所述，以下幾個問題應引起儀器操作人員注意：
1）比色皿架及比色皿在使用中的正確到位問題。
有些使用者對這個問題不夠重視，因操作不當造成偶然誤差，嚴重影響分析結果。首先，應保證比色皿不傾斜放置。稍許傾斜，就會使參比樣品與待測樣品的吸收光徑長度不一致，還可能使入射光不能全部通過樣品池，導致測試比準確度不符合要求。其次，應保證每次測試時，比色皿架推拉到位。若不到位，將影響到測試值的重復性或準確度。最后,還應保證比色皿的清潔度,延長其使用壽命。
2）干燥劑的使用問題。干燥劑失效將導致：
a）數(shù)顯不穩(wěn)、無法調“0”點或“100%”點（電路或光電管受潮）。
b）反射鏡發(fā)霉或沾污，影響光效率、雜散光增加。鑒于上述原因，分光光度計的放置地點應遠離水池等濕度大的地方、干燥劑應定期更換或烘烤。
3）儀器的工作環(huán)境
應避免陽光直射、避免強電場、避免與較大功率的電器設備共電、避開腐蝕性氣體等。
